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鼠尾基因组DNA提取试剂盒

无RNA酶污染:试剂盒提供的DNA-Only Column使得实验过程中无需额外添加RNA酶即可去除基因组DNA中的RNA,避免实验室遭受外源RNA酶污染。

速度快:Foregene Protease Plus具有比同类蛋白酶更高的活性,搭配Buffer TL1酶解缓冲液可以在45分钟内完全酶解鼠尾组织,无需4℃过夜处理;操作简单,基因组DNA提取操作在90分钟内即可完成。

方 便:离心操作均在常温,无需4℃低温离心或乙醇沉淀DNA。

安 全:无需有机试剂抽提。

质量高:提取获得的基因组DNA片段大、无RNA、无RNA酶、离子含量极低,能满足各种实验的要求。

产 品 名 称

鼠尾基因组DNA提取试剂盒

Mouse Tail DNA Mini Kit

货    号

DE-05211

规    格

50T

价    格

¥712.00

描    述

提取鼠尾基因组DNA最快的试剂盒,1小时能从鼠尾中提取到高质量的基因组DNA。

产品介绍

由于鼠尾自身的结构和性质,提取鼠尾基因组DNA一直以来都困扰着研究人员:一是鼠尾处理时间长,基因组DNA易降解;二是处理困难,提取的基因组DNA纯度低。

本试剂盒采用可以特异性结合DNADNA-Only Column、全新的Foregene Protease以及独特的缓冲液体系,可以在45min内消化鼠尾样品,从而最大程度上避免了基因组DNA的降解,缩短了样本处理时间。试剂盒可以在60-90min内从0.5-1cm幼年或成年小鼠鼠尾中提取到10-20μg高质量、高纯度基因组DNA。

离心柱中采用的DNA-only硅胶基质材料为本公司特有的新型材料,能高效、特异的吸附DNA,对DNA的最大吸附量为80μg,独特的缓冲、洗脱体系可最大限度的去除RNA、杂质蛋白、离子及细胞中其他有机化合物。提取得到的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠,DNA片段大小稳定在23kb左右。

也可以使用该试剂盒提取出鼠尾外的鼠其他组织,包括鼠耳、鼠肌肉、鼠肝脏等组织,做到一试剂盒多用,满足用户进行不同的实验需要。


试剂盒应用

该试剂适用于新鲜或冻存的大、小鼠鼠尾(也可以用于纯化小鼠或大鼠肌肉、鼠耳基因组DNA)基因组DNA提取纯化。


纯化DNA的应用

鼠尾基因组DNA提取试剂盒纯化获得的基因组DNA纯度高,可用于常规分子生物学操作,如:酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。


DNA提取得率和纯度

鼠尾基因组DNA的产量与样本大小、保存条件、酶解程度以及操作有关,鼠尾基因组DNA提取试剂盒提供了一种有效、快速获得鼠尾基因组DNA的手段。获得基因组DNA纯度高,降解少,其OD260/280=1.7-1.9。


试剂盒内容

Buffer TL1:提供鼠尾酶解环境。

Foregene Protease Plus:在Buffer TL1的环境下酶解组织样本。

Buffer TL2:失活Foregene Protease Plus,并提供DNA上柱环境。

Buffer PW:去除DNA中的蛋白质、RNA等杂质。

Buffer WB:去除DNA中的残留的盐离子。

Buffer EB:洗脱纯化柱膜上的DNA。

DNA-only Column:特异吸附裂解产物中的基因组DNA。


产品信息

型号

离心柱型

纯化组件

Foregene离心柱、试剂

通量

1-24个样品

制备时间

60-90 min (24个样品)

离心机

台式离心机

组织酶解物分离

离心分离

离心柱液体盛装量

800 μL

纯化柱DNA承载量

80 μg

洗脱体积

100-200 μL

鼠尾样本处理量

0.5-1 cm


操作流程

鼠尾基因组DNA提取-1


  • 提取过程中无法获得基因组DNA

    Answer

    通常有多种因素会影响鼠尾基因组DNA产量,包括鼠尾来源、样本保存条件、酶解程度、操作等。

    1.    组织样本保存不当或保存时间太长,导致基因组DNA已经降解。

    建议:组织样本保存于液氮或者-80;尽量用刚剪取的鼠尾样本进行基因组DNA的提取。

    2.    鼠尾没有进行剪碎处理。

    建议:由于鼠尾自身结构复杂,尽量将鼠尾剪短至1mm左右,这样可以使酶解进行的更彻底;对于老年小鼠鼠尾,可以适当增加酶解时间。

    3.    Foregene Protease Plus保存不当,导致其活性降低或失活。

    建议:确认Foregene Protease Plus保存条件或者更换新的Foregene Protease Plus进行酶解反应。

    4.    试剂盒保存不当或存放时间太长,导致试剂盒里面某些组分失效。

    建议:购置新的通用型基因组DNA提取试剂盒进行相关操作。

    5.    Buffer WB没有添加无水乙醇。

    建议:确认Buffer WB中添加正确体积的无水乙醇。

    6.    洗脱液没有正确滴加到硅胶膜上。

    建议:将洗脱液滴加到硅胶膜的正中间,并在室温放置2分钟增加洗脱效率。


  • 提取获得低产量基因组DNA

    Answer

    1.    样本保存不当或保存时间太长,导致基因组DNA降解。

    建议:组织样本保存于液氮或者-80;尽量采用新近采取组织样本进行基因组DNA的提取。

    2.    鼠尾剪取太短,提取到的基因组DNA含量会较少。

    建议:鼠尾用量建议为0.5-1cm,以便提取获得可观的基因组DNA。

    3.    鼠尾没有进行剪碎处理。

    建议:由于鼠尾自身结构复杂,尽量将鼠尾剪短至1mm左右,这样可以使酶解进行的更彻底。

    4.    Foregene Protease Plus保存不当,导致其活性降低或失活。

    建议:确认Foregene Protease plus保存条件或者更换新的ForegeneProtease plus进行酶解反应。

    5.    鼠尾酶解时间太短。

    建议:酶解时间不宜太短,应大于30分钟。65酶解1小时可以完全消化鼠尾组织,只剩骨骼和毛发。对于成年小鼠或老年小鼠可以适当增加酶解时间,以便酶解更彻底。

    6.    洗脱液问题。

    建议:请使用Buffer EB进行洗脱;如果使用ddH2O或其他洗脱液,确认洗脱液的pH值在7-8.5之间。

    7.    洗脱液没有正确滴加。

    建议:请将洗脱液滴加到硅胶膜的正中间,并在室温放置2分钟增加洗脱效率。

    8.    洗脱液体积太少。

    建议:请按说明书上要求使用洗脱液进行基因组DNA洗脱,最少不要低于100μL。


  • 提取获得基因组DNA纯度低

    Answer

    基因组DNA纯度低会导致下游实验的失败或效果差,如:酶切不开,PCR得不到目的基因片段等。

    1.    杂蛋白污染、RNA污染。

    分析:没有使用Buffer PW洗涤纯化柱;Buffer PW洗涤纯化柱没有使用正确的离心转速。

    建议:在上清液过柱时尽量保证上清液中无沉淀;务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱,并且此步骤不能省略。

    2.    杂质离子污染。

    分析:省略了Buffer WB洗涤纯化柱或者只洗涤了一次,导致残留的离子污染。

    建议:务必按说明书使用Buffer WB洗涤2次,以尽量去除残留的离子。

    3.    RNA酶污染。

    分析:Buffer中添加了外源的RNA酶;Buffer PW洗涤操作不正确,导致RNA酶残留,影响下游RNA实验操作,如:体外转录等。

    建议:Foregene系列核酸提取试剂盒无需额外添加RNA酶即可去除RNA,Mouse Tail DNA Mini Kit里面所有试剂均无需添加RNA酶;务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱,并且此步骤不能省略。

    4.    乙醇残留。

    分析:Buffer WB洗涤纯化柱后,没有进行空管离心操作。

    建议:按说明书进行正确的空管离心操作。


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