产 品 名 称 | 植物基因组DNA提取试剂盒 Plant DNA Isolation Kit |
货 号 | DE-06111 |
规 格 | 50T |
价 格 | ¥436.00 |
描 述 | 快速从植物样本（包括多糖多酚植物样本）中纯化获得高质量的基因组DNA。 |
产品介绍
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的DNA-Only Column、全新的Foregene Protease以及独特的缓冲体系，大大简化了植物基因组DNA提取步骤，在30分钟内可获得高纯度基因组DNA，极大程度上避免了基因组DNA的降解。
离心柱中的DNA-Only硅胶膜可高效、特异吸附DNA，无需添加任何有机试剂即可最大限度的去除RNA、杂质蛋白、离子及多糖、多酚等有机化合物。获得的DNA片段大，纯度高、质量稳定可靠。
试剂盒应用
该试剂盒适用于新鲜或冻存的植物组织基因组DNA提取纯化。
纯化DNA的应用
植物基因组DNA提取试剂盒纯化获得的基因组DNA纯度高，可用于常规分子生物学操作，如：酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。
DNA提取得率和纯度
提取获得的植物基因组DNA量与植物样本的来源、样本的新鲜程度、保存条件、水分含量等因素相关。使用PlantDNA Isolation Kit处理各种来源植物新鲜叶片样本，获得的基因组DNA量和纯度见下表：
新鲜幼嫩叶片 | 样本用量(mg) | DNA产量(μg) | OD260/280 |
玉米 | 100 | 4-7 | 1.7-1.9 |
大豆 | 100 | 5-7 | 1.7-1.9 |
小麦 | 100 | 10-14 | 1.7-1.9 |
棉花 | 100 | 3-5 | 1.7-1.9 |
水稻 | 100 | 4-6 | 1.7-1.9 |
烟草 | 100 | 5-7 | 1.7-1.9 |
油菜 | 100 | 2-3 | 1.7-1.9 |
注意：此表数据仅作参考，实际操作中由于所用材料的存储条件、操作熟练度等因素影响，所得数据会与此表数据有些许出入。
试剂盒内容
Buffer PL1：提供植物组织裂解环境。
Foregene Protease：在Buffer PL1的环境下酶解植物组织中的蛋白质。
Buffer PL2：失活Foregene Protease，并提供DNA上柱环境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白质、RNA等杂质。
Buffer WB：去除DNA中的残留的盐离子。
Buffer EB：洗脱纯化柱膜上的DNA。
DNA-only Column：特异吸附裂解产物中的基因组DNA。
产品信息
型号 | 离心柱型 | 纯化组件 | Foregene离心柱、试剂 |
通量 | 1-24个样品 | 制备时间 | ~30 min (24个样品) |
离心机 | 台式离心机 | 样本酶解物分离 | 离心分离 |
离心柱液体盛装量 | 800 μL | 纯化柱DNA承载量 | 80 μg |
洗脱体积 | 100-200 μL | 植物样本处理量 | 100 mg |
操作流程
说明书
产品文献
A simple and cost-effective method for screening of CRISPR/Cas9-induced homozygous/biallelic mutants
Jinggong Guo, Kun Li, Lifeng Jin, Rui Xu, Kaiting Miao, Fengbo Yang,Chaoya Qi, Lin Zhang, Jose R.Botella, Ran Wang, Yuchen Miao
河南大学植物胁迫生物学研究所生物系棉花生物学国家重点实验室
Plant Methods ( IF 4.269 ) Pub Date : 2018-05-29, DOI：10.1186/s13007-018-0305-8
文章链接：https://plantmethods.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13007-018-0305-8
DNA barcoding analysis and phylogenetic relationships of tree species in tropical cloud forests
Yong Kang, Zhiyan Deng, Runguo Zang & Wenxing Long
海南热带生物资源可持续利用重点实验室Scientific Reports ( IF 4.259 ) Pub Date : 2017-10-02, DOI：10.1038/s41598-017-13057-0
文章链接：https://www.nature.com/articles/s41598-017-13057-0
Complete Chloroplast Genome Sequence of Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg and Evolution Analysis within the Malvales Order
Ying Wang, Di-Feng Zhan, Xian Jia, Wen-Li Mei, Hao-Fu Dai, Xiong-Ting Chen* and Shi-Qing Peng
中国热带农业科学院热带生物科学与生物技术研究所
农业部热带作物生物学与遗传资源重点实验室
Frontiers in Plant Science ( IF 4.495 ) Pub Date : 2016-03-08, DOI：10.3389/fpls.2016.00280
文章链接：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4781844/
MSDS
COA
提取过程中无法获得基因组DNA
Answer
通常有多种因素会影响基因组DNA产量，包括样本来源、样本新老程度、样本保存条件、操作等。
1. 组织样本保存不当或保存时间太长，导致基因组DNA已经降解。
建议：组织样本保存于液氮或者-20℃；尽量使用新近采集样本进行基因组DNA的提取。
2. 样本用量过少可能导致提取不到相应的基因组DNA。
建议：对于保存时间很长或基因组DNA降解比较厉害的组织样本，可以适当增加组织样本的用量，以便提取获得可观的基因组DNA。可以根据DNA需要确定样本的用量，但是新鲜样本不宜超过100mg，干燥样本不宜超过30mg。
3. 样本没有进行液氮研磨或液氮之后放置时间过长。
建议：在进行DNA提取时，样本需进行液氮充分研磨以破碎细胞壁；研磨完成后请尽快将样本粉末转移至65℃预热的Buffer PL1中(一旦研磨的粉末融化，基因组DNA便开始快速降解)。
4. Foregene Protease保存不当，导致其活性降低或失活。
建议：确认Foregene Protease保存条件或者更换新的Foregene Protease进行酶解反应。
5. 试剂盒保存不当或存放时间太长，导致试剂盒里面某些组分失效。
建议：购置新的植物基因组DNA提取试剂盒进行相关操作。
6. 试剂盒使用不当。
建议：购置样本专用的植物基因组DNA提取试剂盒(Plant DNA Isolation Kit)进行植物基因组DNA的提取纯化。
7. Buffer WB没有添加无水乙醇。
建议：确认Buffer WB中添加正确体积的无水乙醇。
8. 洗脱液没有正确滴加到硅胶膜上。
建议：将65℃预热的洗脱液滴加到硅胶膜的正中间，并在室温放置5分钟增加洗脱效率。
提取获得低产量基因组DNA
Answer
1. 样本保存不当或保存时间太长，导致基因组DNA降解。
建议：组织样本保存于-20℃；尽量使用新近采集组织样本进行基因组DNA的提取。
2. 组织样本用量过少，提取到的基因组DNA含量会较少。
建议：有些植物样本含水量丰富，比如：水生植物如藻类等，可以适当增加其用量或将其稍微失水后再进行操作。
3. 样本液氮研磨不彻底或者研磨完成后在室温放置时间过长。
建议：液氮研磨一定要充分，尽量破碎样本细胞壁；研磨完成后立即将样本粉末转移至65℃预热的Buffer PL1中进行下一步操作。
4. 没有使用正确的试剂盒。
建议：使用专用的植物基因组DNA提取试剂盒(Plant DNA Isolation Kit)进行植物基因组DNA的提取纯化。
5. ForegeneProtease保存不当，导致其活性降低或失活。
建议：确认Foregene Protease保存条件或者更换新的Foregene Protease进行酶解反应。
6. 洗脱液问题
建议：请使用Buffer EB进行洗脱；如果使用ddH2O或其他洗脱液，确认洗脱液的pH值在7.0-8.5之间。
7. 洗脱液没有正确滴加
建议：请将洗脱液滴加到硅胶膜的正中间，并在室温放置5分钟增加洗脱效率。
8. 洗脱液体积太少
建议：请按说明书上要求使用洗脱液进行基因组DNA洗脱，最少不要低于100μL。
提取获得基因组DNA纯度低
Answer
基因组DNA纯度低会导致下游实验的失败或效果差，如：酶切不开，PCR得不到目的基因片段等。
1. 杂蛋白污染、RNA污染。
分析：没有使用Buffer PW洗涤纯化柱；Buffer PW洗涤纯化柱没有使用正确的离心转速。
建议：在上清液过柱时尽量保证上清液中无沉淀；务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱，并且此步骤不能省略。
2. 杂质离子污染。
分析：省略了Buffer WB洗涤纯化柱或者只洗涤了一次，导致残留的离子污染。
建议：务必按说明书使用Buffer WB洗涤2次，以尽量去除残留的离子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；Buffer PW洗涤操作不正确，导致RNA酶残留，影响下游RNA实验操作，如：体外转录等。
建议：Foregene系列核酸提取试剂盒无需额外添加RNA酶即可去除RNA，Plant DNA Isolation Kit里面所有试剂均无需添加RNA酶；务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱，并且此步骤不能省略。
4. 乙醇残留。
分析：Buffer WB洗涤纯化柱后，没有进行空管离心操作。
建议：按说明书进行正确的空管离心操作。
